Содержание
1. Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
2. Принцип метода полимеразной цепной реакции
2.1 Наличие в реакционной смеси ряда компонентов
2.2 Циклический температурный режим
Возможно вы искали - Доклад: Полимеры медико-биологического назначения
2.3 Основные принципы подбора праймеров
2.4 Эффект "плато"
3. Cтадии постановки ПЦР
3.1 Подготовка пробы биологического материала
3.2 Амплификация
Похожий материал - Реферат: Полиомиелит: вирусологическая диагностика и лечение
3.3 Оценка результатов реакции
3.3.1 Метод горизонтального электрофореза
3.3.2 Метод вертикального электрофореза
3.4 Контроль за прохождением реакции амплификации
3.4.1 Положительные контроли
Очень интересно - Реферат: Полиомиелит: исторический очерк, эпидемиология и изменения внутренних органов
3.4.2 Внутренние контроли
4. Методы, основанные на полимеразной цепной реакции
4.1 Качественный анализ
4.1.1 Способ постановки ПЦР с использованием “горячего старта"
4.1.2 Детекция молекул РНК
Вам будет интересно - Реферат: Полиомиелит: паралитическая, восстановительная и остаточная стадии
5. Организация технологического процесса постановки ПЦР
Заключение
1. Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
Полимеразная цепная реакция - это метод, имитирующий естественную репликацию ДНК и позволяющий обнаружить единственную специфическую молекулу ДНК в присутствии миллионов других молекул.
Открытие метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) стало одним из наиболее выдающихся событий в области молекулярной биологии за последнее десятилетие. Это позволило поднять медицинскую диагностику на качественно новый уровень.
Впервые состав ингредиентов, входящих в реакционную смесь для постановки полимеразной цепной реакции, и основные принципы использования праймеров (коротких искусственно синтезированных молекул ДНК) для получения копий ДНК были описаны Kleppe с соавт. в 1971 году. Однако тогда еще не была продемонстрирована основная черта ПЦР - экспоненциальное увеличение количества копий фрагмента исходной ДНК как результат реакции.
Похожий материал - Реферат: Полиомиелит: патогенез
В 1983 году Kary Mullis предложил метод, ставший в дальнейшем известным как полимеразная цепная реакция. Суть метода заключается в многократном копировании (амплификации) в пробирке определенных участков ДНК в процессе повторяющихся температурных циклов. На каждом цикле амплификации синтезированные ранее фрагменты вновь копируются ДНК-полимеразой. Благодаря этому происходит многократное увеличение количества специфических фрагментов ДНК в миллиарды раз, что значительно упрощает дальнейший анализ.
В этот период были обнаружены уникальные микроорганизмы, живущие в гейзерах. Их ферментная система, в частности ДНК-полимераза, выдерживает высокие температуры горячих источников и сохраняет свою биологическую активность вплоть до 95° С, что является необходимым условием для проведения полимеразной цепной реакции.
Результатом открытия ПЦР стало почти немедленное практическое применение метода.
Перспективы практического использования ПЦР-диагностики